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用修饰的单链dna和小分子改善非病毒敲入

将Cas9目标序列添加到长单链dna中,结合小分子鸡尾酒促进同源定向修复,可显著增强原代人T细胞和其他造血细胞类型的非病毒敲入效率和产量。

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图1:ssDNA CTS模板和小分子提高了非病毒敲入产量和纯度。

参考文献

  1. 罗斯,t.l.等人。用非病毒基因组靶向重新编程人类T细胞功能和特异性。自然559, 405-409(2018)。本文描述了一种使用裸DNA的非病毒敲入策略,并报告了与ssDNA模板的低毒性和脱靶集成。

    文章中科院谷歌学者

  2. 埃奎姆,J.等人。用CRISPR/Cas9将CAR靶向到TRAC位点可以增强肿瘤排斥反应。自然543, 113-117(2017)。本文描述了一种aav介导的敲入CAR-T细胞生成策略。

    文章中科院谷歌学者

  3. Nguyen, D. N. & Roth, T. L.聚合物稳定的Cas9纳米颗粒和修饰的修复模板提高基因组编辑效率。生物科技Nat。》。38, 44-49(2020)。本文描述了通过在dsDNA模板上包含Cas9目标序列来提高敲入效率。

    文章中科院谷歌学者

  4. 林晓,等。人类原代细胞中crispr - cas9介导的核转运和纳米结构基因的基因组整合。核酸测定。50, 1256-1268(2022)。本文介绍了多种DNA折纸结构的CTS模板。

    PubMed公共医学中心谷歌学者

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这是一个总结:害羞,B. R.等。利用混合ssDNA修复模板和小分子鸡尾酒在原代细胞中进行高产基因组工程。Nat。https://doi.org/10.1038/s41587-022-01418-8(2022)。

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用修饰的单链dna和小分子改善非病毒敲入。生物科技Nat》(2022)。https://doi.org/10.1038/s41587-022-01420-0

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